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細(xì)胞培養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)過程中污染有哪些原因?
發(fā)布時(shí)間:11月10日 瀏覽:5494   [ ] 視力保護(hù)色:
污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵。防備和避免污染是細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵之一。一開端就要十分重視,避免污染,不然會(huì)前功盡棄,不只糟蹋時(shí)間,并且糟蹋人力、物力,乃至構(gòu)成無法彌補(bǔ)的丟失。 細(xì)胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有 7 種,分別是細(xì)菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、病毒污染以及非細(xì)胞污染。他們?cè)诩?xì)胞培養(yǎng)中污染的特色如下:
1. 細(xì)菌:細(xì)菌在一般倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會(huì)污濁變黃,對(duì)細(xì)胞成長(zhǎng)影響顯著。
2. 支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會(huì)污濁,原體感染,國內(nèi)血清許多都沒有做支原體陰性檢測(cè),而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。并且它不能用過濾的方法除掉。支原體感染細(xì)胞今后,細(xì)胞病變不很顯著,僅僅漸漸死去。
3. 黑膠蟲:能夠穿透濾膜,也能夠經(jīng)過空氣傳達(dá),低倍下為黑色點(diǎn)狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會(huì)太影響,細(xì)胞仍是能夠用的。常常是細(xì)胞成長(zhǎng)狀況杰出,且觀測(cè)到的運(yùn)動(dòng)物無顯著增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無顯著變化,可在同一批號(hào)的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對(duì)細(xì)胞成長(zhǎng)狀況不會(huì)有顯著影響,在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)自然消失,除替換血清外無須特別處理。
4. 真菌:一般培養(yǎng)液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開端很像死細(xì)胞碎片,僅僅它許多許多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細(xì)胞碎片分不清,漸漸的會(huì)長(zhǎng)出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌成長(zhǎng)的比較慢,不象細(xì)菌那么簡(jiǎn)單被發(fā)現(xiàn),可是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了,也很難救活了。
5. 原蟲:培養(yǎng)液可細(xì)微污濁,顯微鏡下那些細(xì)微的點(diǎn)狀物數(shù)量十分多,細(xì)微活動(dòng),細(xì)胞雖然能夠成長(zhǎng)但繁衍速度卻顯著減慢,并且細(xì)胞狀況欠好,邊際不清楚,細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞搶奪養(yǎng)分。這種共生是十分遍及的,但他們的數(shù)量小,細(xì)胞站優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常成長(zhǎng),只有當(dāng)他們抵達(dá)必定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的成長(zhǎng),終究構(gòu)成惡性循環(huán)。
6. 病毒:安排細(xì)胞培養(yǎng)過程中,假如沒有除掉潛在的病毒,就會(huì)發(fā)作病毒污染?,F(xiàn)在,從原代猴腎細(xì)胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于 20 種血清性病毒。 雖然病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng),但出產(chǎn)疫苗是不安全的。因而,潛在病毒是細(xì)胞大量出產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題
7. 非同種細(xì)胞污染 :便是細(xì)胞穿插污染,因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)操作時(shí)各細(xì)胞株所需的器件和溶液沒有嚴(yán)格分開,往往會(huì)使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染。現(xiàn)在,世界上已有幾十種細(xì)胞都被 HeLa 細(xì)胞所污染,致使許多實(shí)驗(yàn)宣告無效。非細(xì)胞培養(yǎng)物所構(gòu)成的化學(xué)成分的污染也偶有發(fā)作,大多是因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)所需物品清洗消毒不完全而帶入一些有毒化學(xué)物質(zhì)所造成的。 在上述的八種污染物中,黑膠蟲是現(xiàn)代細(xì)胞培養(yǎng)中評(píng)論比較多的,但大多數(shù)文獻(xiàn)未對(duì)其進(jìn)行描繪或一帶而過,就像上面關(guān)于描繪黑膠蟲的狀況是不完整,還有許多不明的狀況。對(duì)其身份有多種猜想,到現(xiàn)在都沒有權(quán)威地對(duì)黑膠蟲進(jìn)行分類學(xué)上的歸類。黑膠蟲究竟是不是一種生物,假如是那黑膠蟲會(huì)是何種生物,假如不是,那黑膠蟲會(huì)是什么?一系列的問題都懸在斗爭(zhēng)在細(xì)胞生物學(xué)范疇的學(xué)者們的心中。
相關(guān)標(biāo)簽: WB細(xì)胞
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