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ELISA試劑盒雜交液內除含一定濃度的標記探針外，還富含較高濃度的鹽類、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛血清白蛋白及載體DNA或RNA等。
雜交液中富含較高濃度的Na+可使雜交率添加，能夠減低探針與安排標本之間的靜電聯(lián)系。甲酰胺可使Tm下降，雜交液中含每1%的甲酰胺可分別使RNA:RNA，RNA:DNA，DNA:DNA的雜交溫度下降0.35℃，0.5℃和0.65℃。所以，雜交液中加入適當?shù)募柞０?，可防止因雜交溫度過高而導致的安排形態(tài)構造的損壞以及標本的掉落。硫酸葡聚糖能與水聯(lián)系，然后減少雜交液的有用容積，進步探針有用濃度，以到達進步雜交率的意圖（特別對雙鏈核酸探針）。在雜交液中加入牛血清白蛋白及載體DNA或RNA等，都是為了阻斷探針與安排構造成分之間的非特異性聯(lián)系，以減低布景。
ELISA試劑盒探針的長度：
通常應在50-300個堿基之間，最長不宜超越400個堿基。探針短易進入細胞，雜交率高，雜交時間短。ELISA試劑盒 防止污染：
因為在手指肌膚及試驗室用玻璃器皿上均也許富含RNA酶，為防止其污染影響試驗成果，在全部雜交前處理進程中都需要戴消毒手套，試驗所用玻璃器皿及鑷子都應于試驗前一日置高溫烘烤（180℃）以到達消除RNA酶的意圖。雜交前及雜交時所用的溶液均需經高壓消毒處理。
雙鏈DNA探針和靶DNA的變性：
雜交反響進行時，探針和靶核酸都有必要是單鏈的。如果用雙鏈DNA探針進行雜交（包含檢查RNA時），雙鏈DNA探針在雜交前有必要進行變性。探針變性后要立即進行雜交反響，否則解鏈的探針又會重新復性。
ELISA試劑盒探針的濃度：
探針濃度依其品種和試驗請求略有不同，通常為0.5-5.0μg/ml（0.5-5.0ng/μl）。最適合的探針濃度要經過試驗才干斷定。
 
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